干細胞外泌體label free

來源: 發(fā)布時間:2023-05-27

Buller等利用miR-146b的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細胞,使其分泌的外泌體負載miR-146b,并將外泌體注射至移植到小鼠體內(nèi)的GBM處。結(jié)果表明,這種利用外泌體運輸miRNA進行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流,體內(nèi)zhiliao不同于體外細胞實驗,更需考慮腦部組織微環(huán)境對藥物的影響,外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而,至今還沒有利用外泌體載藥經(jīng)靜脈注射zhiliaoGBM的報道,這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此,Wood等報道的在進行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經(jīng)元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經(jīng)靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力,因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。外泌體可以作為藥物治理的遞送系統(tǒng)。干細胞外泌體label free

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外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70—90個堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(雙鏈)但是和siRNA密切相關(guān)。microRNA通過和靶基因mRNA堿基配對引導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻譯,從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達。microRNA在物種進化中相當(dāng)保守,在動物、植物等中發(fā)現(xiàn)的microRNA表達均有嚴格的組織特異性和時序性。microRNA在細胞生長和發(fā)育過程中起多種作用,包括調(diào)控發(fā)育、分化、凋亡和增殖等。唾液提取試劑盒服務(wù)活內(nèi)的外泌體動態(tài)(哪個外泌體遷移至何處)也會成為今后需要努力研究的重要課題。

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外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細胞)。

當(dāng)外泌體在第1次被發(fā)現(xiàn)的時候,外泌體被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、瘤侵襲等方方面面。有研究表明瘤來源的外泌體參與到瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進了瘤的生長與侵襲。流式細胞技術(shù)是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,其用于外泌體定量檢測的準(zhǔn)確性也在不斷上升。

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外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。長鏈非編碼RNA(longnon-codingRNA)是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200nt、不編碼蛋白的RNA。近年來的研究表明lncRNA能在標(biāo)貫遺傳、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)控基因表達,參與了X染色體沉默、基因組印記以及染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄jihuo、轉(zhuǎn)錄干擾、核內(nèi)運輸?shù)榷喾N重要的調(diào)控過程,與人類疾病的發(fā)生、發(fā)展和防治都有著密切聯(lián)系。lncRNA芯片對lncRNA進行功能研究也被更多的關(guān)注,通過設(shè)計不同的lncRNA探針,可以更加快速、高通量地篩選出疾病或特定生物學(xué)過程中差異表達的lncRNA和mRNA信息,找到lncRNA的靶基因位點深入分析調(diào)控機制。在過去幾年中,有幾個實驗室報道了各種細胞類型的外泌體分泌,并討論了其潛在的生物學(xué)功能。牛奶提取試劑盒成分

外泌體是分泌的細胞外囊泡的主要群體,是具有生物活性的脂雙層囊泡。干細胞外泌體label free

Knepper等通過對透射電鏡得到的200個囊泡進行粒徑分析,結(jié)果表明尿液中外泌體的粒徑分布約為35~40nm,磷脂雙分子層厚度約為直徑的1/5~1/10。透射電鏡結(jié)合免疫金標(biāo)記法能夠得到外泌體表面特征分子的信息,有助于揭示外泌體的產(chǎn)生機制與來源。動態(tài)光散射(dynamiclightscattering,DLS)和納米顆粒跟蹤分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis,NTA)都是利用光學(xué)手段獲得囊泡粒徑分布的方法。兩者的不同之處在于動態(tài)光散射通過檢測散射光的強度計算得到顆粒粒徑,而納米顆粒跟蹤分析通過追蹤單個粒子的運動軌跡計算得到樣品濃度、粒徑分布等信息。干細胞外泌體label free

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