HE染色樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,確保組織位置規(guī)整。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后,進(jìn)行降溫冷凍,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果,然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片,厚度在4-8um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟:將待測組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進(jìn)行染液染色的時(shí)候,染液可以充分進(jìn)入組織種,同時(shí),二甲苯還可以起到透明的作用,使切片更容易觀察。讓您放心的實(shí)驗(yàn)外包公司,專業(yè)HE染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。陜西靠譜的HE染色
HE染色注意事項(xiàng):1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,否則無論進(jìn)行那種染色都會(huì)發(fā)生困難。脫蠟時(shí)間要充分,若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時(shí)更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時(shí)間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會(huì)減弱,著色不鮮艷,呈灰藍(lán)色時(shí)應(yīng)及時(shí)更換新液。 3.染色的時(shí)間長短需依據(jù):染劑對(duì)組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié)。所以在染色時(shí)必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時(shí)間。 4.分化十分重要。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過淡,過深等現(xiàn)象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復(fù)染后,組織會(huì)呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象。 5.還原液不宜過濃,若堿性太強(qiáng)易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復(fù)染過深胞核會(huì)不清晰,影響鏡檢。 四川結(jié)果客觀的HE染色分析HE染色是病理實(shí)驗(yàn)中比較用的一種基礎(chǔ)染色方法。
HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因:(1)組織處理溫度過高、過熱,在石蠟停留的時(shí)間過長;(2)固定時(shí)間太短,接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對(duì)策:理論上來說,加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,組織不能在熱的蠟液中停留過長時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理,完成浸蠟處理后的組織,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,以備包埋。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好,脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,對(duì)組織細(xì)胞的各種成分都可著色,便于***觀察組織構(gòu)造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。經(jīng)過HE染色,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色。可以觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等。首先切片組織是否完整,組織有無損傷;然后看切片有無刀痕;***細(xì)胞核是否清晰可見,胞核與包漿要對(duì)比鮮明。關(guān)于HE染色,你不知道的實(shí)驗(yàn)技巧。
HE染色實(shí)驗(yàn)步驟:(1)樣品制備:對(duì)于貼壁生長細(xì)胞,胰酶消化,調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后,取出細(xì)胞爬片,用PBS洗滌3次。(2)樣品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次,每次1min。(3)染核:蘇木素染液染色2-3min,自來水洗滌。(4)分色:鏡下觀察,若細(xì)胞核染色過深,用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,自來水洗滌。(5)染胞質(zhì):浸入伊紅染液染色1min,自來水洗滌。(6)吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后,中性樹膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定,則染色時(shí)間相應(yīng)延長,蘇木素染色12-15min,伊紅5min即可HE染色,優(yōu)先南京英瀚斯生物。天津性價(jià)比高的HE染色外包
肺部組織HE染色如何觀察。陜西靠譜的HE染色
HE染色顯微鏡下見切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對(duì)原因:切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒有完全脫水,導(dǎo)致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分。對(duì)策:移去蓋玻片,用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠。將切片置入新鮮的無水乙醇中,待切片重新脫水完全后,用新二甲苯透明,中性樹膠封固。所有用于脫水和透明的液體,在使用一定時(shí)間以后,應(yīng)即時(shí)更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對(duì)原因:蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對(duì)策:移去蓋玻片,重新用干凈的蓋玻片封片陜西靠譜的HE染色
南京英瀚斯生物科技有限公司坐落在南京市棲霞區(qū)燕子磯街道和燕路371號(hào)東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng)樓A311,是一家專業(yè)的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包、分子實(shí)驗(yàn)檢測、病理染色檢測、科研實(shí)驗(yàn)外包、動(dòng)物模型構(gòu)建、第三方檢測、病理組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)、電生理檢測、醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展、生物醫(yī)藥技術(shù)研發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢及技術(shù)服務(wù)公司。公司目前擁有較多的高技術(shù)人才,以不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競爭力,加快企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新,實(shí)現(xiàn)穩(wěn)健生產(chǎn)經(jīng)營。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:實(shí)驗(yàn)外包,動(dòng)物模型構(gòu)建,細(xì)胞分子實(shí)驗(yàn),病理檢測等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營宗旨,深受客戶好評(píng)。公司深耕實(shí)驗(yàn)外包,動(dòng)物模型構(gòu)建,細(xì)胞分子實(shí)驗(yàn),病理檢測,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領(lǐng)域拓展。