掃描電鏡樣本臨界點(diǎn)干燥法 臨界點(diǎn)干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時(shí),其表面張力等于零的特性,使樣品的液體完全汽化,并以氣體方式排掉,來達(dá)到完全干燥的目的。這樣就可以避免表面張力的影響,較好地保存樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)。此法操作較為方便,所用的時(shí)間也不算長(zhǎng),一般約2~3小時(shí)即可完成,所以是較為為常用的干燥方法。但用此法, 需要特殊儀器設(shè)備。臨界點(diǎn)干燥是在臨界點(diǎn)干燥儀中進(jìn)行的,操作步驟如下: a.固定、脫水:按常規(guī)方法進(jìn)行。如樣品是用乙醇脫水的,在脫水至100%后,要用純acetone置換15~20分鐘。 b.轉(zhuǎn)入中間液:由純acetone轉(zhuǎn)入中間液醋酸異戊酯中,時(shí)間約15~30分鐘。 c.移至樣品室:將樣品從醋酸異戊酯中取出,放入樣品盒,然后移至臨界點(diǎn)干燥儀的樣品室內(nèi),蓋上蓋并擰緊以防漏氣。 d.用液體二氧化碳置換醋酸異戊酯:在達(dá)到臨界狀態(tài)(31℃, 72.8大氣壓)后,將溫度再升高10℃,使液體二氧化碳?xì)饣?,然后打開放氣閥門,逐漸排出氣體,樣品即完全干燥。 在掃描電子顯微鏡中,成象的信息主要是電子信息。廣東推薦的掃描電鏡
冷凍電鏡,就是用于掃描電鏡的比較低溫冷凍制樣及傳輸技術(shù)(Cryo-SEM)可實(shí)現(xiàn)直接觀察液體、半液體及對(duì)電子束敏感的樣品,如生物、高分子材料等。樣品經(jīng)過比較低溫冷凍、斷裂、鍍膜制樣(噴金/噴碳)等處理后,通過冷凍傳輸系統(tǒng)放入電鏡內(nèi)的冷臺(tái)(溫度可至-185℃)即可進(jìn)行觀察。其中,快速冷凍技術(shù)可使水在低溫狀態(tài)下呈玻璃態(tài),減少冰晶的產(chǎn)生,從而不影響樣品本身結(jié)構(gòu),冷凍傳輸系統(tǒng)保證在低溫狀態(tài)下對(duì)樣品進(jìn)行電鏡觀察。假如觀察的是透過樣本的掃描電子的話,那么這種顯微鏡被稱為掃描透射電子顯微鏡(Scanning Transmission Electron Microscopy,STEM)。內(nèi)蒙古生物掃描電鏡哪家靠譜掃描電鏡樣品可以在樣品室中作三度空間的平移和旋轉(zhuǎn),因此,可以從各種角度對(duì)樣品進(jìn)行觀察。
在材料領(lǐng)域中,掃描電鏡技術(shù)發(fā)揮著極其重要的作用,被普遍應(yīng)用于各種材料的形態(tài)結(jié)構(gòu)、界面狀況、損傷機(jī)制及材料性能預(yù)測(cè)等方面的研究。利用掃描電鏡可以直接研究晶體缺陷及其產(chǎn)生過程,可以觀察金屬材料內(nèi)部原子的集結(jié)方式和它們的真實(shí)邊界,也可以觀察在不同條件下邊界移動(dòng)的方式,還可以檢查晶體在表面機(jī)械加工中引起的損傷和輻射損傷等。掃描電鏡可粗略分為鏡體和電源電路系統(tǒng)兩部分。鏡體部分由電子光學(xué)系統(tǒng)、信號(hào)收集和顯示系統(tǒng)以及真空抽氣系統(tǒng)組成。
掃描電鏡操作基本步驟 1 、取材 掃描電鏡下觀察的樣品尺寸要求比較寬松,一般1cm3左右樣品都能適合大多數(shù)掃描電鏡觀察。 2 、固定 鋪片培養(yǎng)的細(xì)胞取出浸入 PBS 中,漂洗細(xì)胞表面。然后將細(xì)胞鋪片放入青霉素小瓶中,加 4 ℃ 預(yù)冷的 3% 戊二醛,在 4 ℃ 固定 2h 或過夜,吸出固定劑,用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min ,再用 4 ℃ 預(yù)冷的 1% 鋨酸。在 4 ℃ 固定 1h ,然后用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min 。 3 、脫水 acetone / 醋酸異戊酯( 1 : 1 )脫水 10min ,接下來醋酸異戊酯脫水 30min ,或用系列梯度酒精( 30% 、 50% 、 70% 、 80% 、 90% 、 95% 、 100% )脫水,每種濃度酒精通過 2 次,每次 15min 。 英瀚斯生物,掃描電鏡、透射電鏡都在行!
掃描電鏡具有高分辨率、大景深、對(duì)樣品無損等優(yōu)異性能,并可以與X-射線能譜儀聯(lián)用,使其能夠快速對(duì)微小物質(zhì)的表面形貌及微區(qū)成分進(jìn)行普遍分析,從而為法醫(yī)學(xué)提供客觀依據(jù),為刑偵鑒定提供線索。 利用掃描電鏡對(duì)于人體組織、毛發(fā)、植物殘片、硅藻、花粉、昆蟲、微生物等生物進(jìn)行檢驗(yàn)鑒定,不會(huì)破壞物證的原始形態(tài),可用于判斷死亡時(shí)間,為案件分析提供線索。硅藻檢驗(yàn)法在法醫(yī)學(xué)溺死診斷中具有重要意義,通過掃描電鏡觀察硅藻的形態(tài)及類型能夠查出水域所在位置,若在衣物上發(fā)現(xiàn)異常類型的硅藻則可說明尸體被移動(dòng)過。此外,還可以利用掃描電鏡對(duì)案件現(xiàn)場(chǎng)出現(xiàn)的射擊殘留物、玻璃、汽車涂料、花粉、橡膠、塑料、纖維、毛發(fā)、金屬、土壤等種類繁多的微量物證進(jìn)行檢驗(yàn),是刑偵鑒定、法庭科學(xué)必不可少的分析手段。掃描電鏡這部分主要由電子槍、電磁透鏡、掃描線圈、樣品室組成。江西整體掃描電鏡哪家靠譜
英瀚掃描電鏡可用于觀察動(dòng)物:大腸、絨毛、細(xì)胞、纖維等。廣東推薦的掃描電鏡
掃描電鏡觀察生物試樣。因電子照射而發(fā)生試樣的損傷和污染程度很小。同其他方式的電子顯微鏡比較,因?yàn)橛^察時(shí)所用的電子探針電流小(一般約為10- 10~10- 12A)電子探針的束斑尺寸?。ㄍǔJ? nm到幾十納米),電子探針的能量也比較?。铀匐妷嚎梢孕〉? kV),而且不是固定一點(diǎn)照射試樣,而是以光柵狀掃描方式照射試樣,因此,由于電子照射而發(fā)生試樣的損傷和污染程度很小,這一點(diǎn)對(duì)觀察一些生物試樣特別重要。掃描式電子顯微鏡(SEM)中的電子束盡量聚焦在樣本的一小塊地方,然后一行一行地掃描樣本。入射的電子導(dǎo)致樣本表面散發(fā)出電子,顯微鏡觀察的是這些每個(gè)點(diǎn)散射出來的電子。由于這樣的顯微鏡中電子不必透射樣本,因此其電子加速的電壓不必非常高。場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡是一種比較簡(jiǎn)單的電子顯微鏡,它觀察樣本上因強(qiáng)電場(chǎng)導(dǎo)致的場(chǎng)發(fā)射所散發(fā)出來的電子。廣東推薦的掃描電鏡
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