病理實驗外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致?!窠鉀Q方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時,注意修切整齊。④移動切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時石蠟凍結(jié)太慢?!窠鉀Q方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)太多,則不宜用。③糾正包埋時的缺點。一般待蠟塊周圍凝結(jié)一層,即可放入冷水中。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包,病理染色服務(wù),HE染色。河南哪家做病理實驗外包檢測
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹尼氏染色:神經(jīng)元細胞體包括一個具有皺褶核膜的大細胞核、稀疏的染色質(zhì)和一個明顯的核仁。在細胞體中細胞質(zhì)是尼氏顆粒,即能夠代替粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來顯示如中性紅、亞甲基藍、甲苯胺藍和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時間使一些染色既可以只突出尼氏物質(zhì),也可以顯示神經(jīng)元的細胞核和神經(jīng)膠質(zhì)。各種神經(jīng)細胞內(nèi)都含有尼氏體,但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會因為生理狀態(tài)的變化而變化,尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)蛋白質(zhì)合成的重要部位,當神經(jīng)元受到刺激后,胞體內(nèi)的尼氏體會明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞甲藍、甲苯胺藍和焦油紫等染料染成紫藍色。尼氏染色可清晰的顯示出尼氏小體定位,判斷神經(jīng)細胞是否受損。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。陜西專業(yè)的病理實驗外包推薦實驗外包、病理實驗外包檢測、細胞實驗外包、分子實驗外包。
病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q5:細胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?;蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當浸泡,這些步驟均可一定程度地加強蘇木素染色后的反藍效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實驗步驟。
病理實驗外包,病理染色組織處理的要求:恰當?shù)慕M織處理是做好免疫組化染色的先決條件,也是決定染色成敗的內(nèi)部因素,在組織細胞材料準備的過程中,不僅要求保持組織細胞形態(tài)完整,更要保持組織細胞的抗原性不受損或彌漫,防止組織自溶。如果出現(xiàn)自溶壞死的組織,抗原已經(jīng)丟失,即使用很靈敏的檢測抗體和高超的技術(shù),也很難檢出所需的抗原,反而往往由于組織的壞死或制片時的刀痕擠壓,在上述區(qū)域易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。組織及時取材和固定組織標本及時的取材和固定是做好免疫組化染色的關(guān)鍵第一步,是有效防止組織自溶壞死,抗原丟失的開始,離體組織應(yīng)盡快的進行取材,比較好2h內(nèi),取材時所用的刀應(yīng)銳利,要一刀下去切開組織,不可反復(fù)切拉組織,造成組織的擠壓,組織塊大小要適中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切記取材時組織塊寧可面積大,千萬不能厚的原則,(也就是說組織塊的面積可以大到3cm×5cm,但組織塊的厚度千萬不能超過0.2cm,否則將不利于組織的均勻固定)。固定液快速滲透到組織內(nèi)部使組織蛋白能在一定時間內(nèi)迅速凝固。從而完好的保存抗原和組織細胞形態(tài)。病理實驗外包檢測、細胞實驗外包,靠譜專業(yè)的實驗外包平臺。
病理實驗外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片粘在切片刀不易取下●原因:切片時有靜電作用,產(chǎn)生靜電吸引,在冬季或氣候干燥時常出現(xiàn)這種情況?!窠鉀Q方法:可用加濕器。以增加空氣中的水分,而減少靜電作用。2.切片厚薄不均●原因:①切片微動部分失靈,齒輪跳格。②蠟塊太大,過硬,轉(zhuǎn)動時刀刃受震動?!窠鉀Q方法:①修理切片機失靈的部分,調(diào)整螺旋。加機油潤滑零件,必要時需請專業(yè)技術(shù)人員調(diào)整切片機。②如蠟塊過大,以后取材時注意取材的大小。蠟塊組織過硬,可返回水中浸泡,再重新脫水和包埋。病理實驗外包檢測-南京英瀚斯-第三方檢測機構(gòu)。黑龍江推薦的病理實驗外包服務(wù)
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病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q3:細胞核染色過淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,或蘇木素過度氧化失效,或分化時間太長。對策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,每個3-5min即可,接著重新染色。可以適當?shù)亟M織的嗜堿性以增強核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,自來水沖洗10min染色。Q4:細胞核染色過深,胞漿著藍色答:切片在蘇木素染液中停留過長;或切片太厚;或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。河南哪家做病理實驗外包檢測
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