外泌體提取,PEG-base沉淀法,聚乙二醇(PEG)可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體,其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽(yáng)性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。通過(guò)差速超速離心法(Differential Ultracentrifugation)從細(xì)胞培養(yǎng)基上清或血漿血清中提取外泌體。外泌體組學(xué)_外泌體測(cè)序 南京英瀚斯生物。什么是外泌體提取
外泌存在于人類(lèi)的生殖,妊娠和胚胎發(fā)育需要精細(xì)/動(dòng)態(tài)的細(xì)胞間通信。**、羊水、血液和母乳都含有具有假定功能的外泌體。精漿外泌體與精子成熟有關(guān)。分子譜顯示,microRNAslet-7a,let-7b,miR-148a,miR-375和miR-99a富集于來(lái)自多個(gè)人類(lèi)捐贈(zèng)者的精漿來(lái)源外泌體中,這些miRNA與白細(xì)胞介素(IL-10和IL-13)的表達(dá)有關(guān),提高了外泌體在生殖道常駐免疫中發(fā)揮作用的可能性。精漿來(lái)源的外泌體也能抑制HIV-1***,可能是通過(guò)阻斷HIV早期蛋白轉(zhuǎn)錄***劑(Tat)的招募和HIV-1的后續(xù)轉(zhuǎn)錄。天津比較好的外泌體電鏡外泌體那些事兒,南京英瀚斯生物。
外泌體在國(guó)家自然科學(xué)基金立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是**學(xué) ,近年來(lái)外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在**的形成,耐藥性,檢測(cè)等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在Molecular Cancer (IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過(guò)TLR7/NFκB/c-My信號(hào)通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡。發(fā)表在Journal of Experimental & Clinical Cancer Research(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細(xì)胞外囊泡相關(guān)的miRNA作為子宮內(nèi)膜ai分子標(biāo)志物的可能性。此外,在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病,中醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域也有不少外泌體相關(guān)項(xiàng)目中標(biāo)。
外泌體提取試劑盒,市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,有的是通過(guò)特殊設(shè)計(jì)的過(guò)濾器過(guò)濾掉雜質(zhì)成分,有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來(lái)。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備,隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代,提取效率和純化效果逐漸提高,因而逐漸取代超速離心法并推廣開(kāi)來(lái),并可進(jìn)一步從外泌體中獲得想要的蛋白質(zhì)或者RNA分子,方便快速,因而受到大多數(shù)人的歡迎,并發(fā)表了不少高質(zhì)量的文章!南京英瀚斯,外泌體檢測(cè)服務(wù),分離鑒定都能做。
外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認(rèn)外泌體的形態(tài)學(xué)特征,但無(wú)法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度;流式細(xì)胞儀可測(cè)定的粒徑大小為150nm以上,并不適合檢測(cè)游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺(tái)的納米顆粒追蹤分析 (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 技術(shù),快速、精細(xì)地分析外泌體粒徑分布濃度,為外泌體存在提供有力證據(jù)。目前外泌體的提取方法主要可歸納為以下六種:一是超速離心法;二是過(guò)濾離心;三是密度梯度離心法;四是免疫磁珠法;五是PS親和法;六是色譜法。實(shí)驗(yàn)外包、外泌體檢測(cè)服務(wù)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包、分子實(shí)驗(yàn)外包。上海專(zhuān)業(yè)的外泌體電鏡
揭開(kāi)外泌體神秘面紗,南京英瀚斯生物。什么是外泌體提取
外泌體的生物學(xué)功能取決于起源細(xì)胞和起源組織或細(xì)胞在外泌體產(chǎn)生時(shí)的狀態(tài)。先前的研究表明,外泌體可能像細(xì)胞垃圾袋一樣,排出多余和/或無(wú)功能的細(xì)胞成分。此外,內(nèi)吞囊泡還參與細(xì)胞表面蛋白和信號(hào)分子的循環(huán)。**近的研究表明,外泌體在不同的生物過(guò)程扮演重要的角色, 如血管生成、抗原表達(dá)、細(xì)胞凋亡、凝固、細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài),炎癥和細(xì)胞間信號(hào)。這些角色歸因于能力轉(zhuǎn)移核糖核酸,蛋白質(zhì),酶和脂質(zhì),從而影響生理和病理過(guò)程的各種疾病,包括**、神經(jīng)退行性疾病、***和自身免疫性疾病。什么是外泌體提取
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