細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包ELISA的基本原理是:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,然后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。醫(yī)學(xué)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包分析結(jié)果該怎么看?陜西細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)
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洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)聚,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯待塑料對蛋白質(zhì)的吸附作用是普遍性的。因此在ELISA測定的反應(yīng)過程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附,而在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。在標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯(吐溫,Tween)一類物質(zhì)即右達(dá)到此目的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,為非離子型的表面張力物質(zhì),常作為助溶劑。根據(jù)脂肪酸的種類而對聚山梨酯編號,結(jié)合月桂酸的為聚山梨酯20,在ELISA中比較為常用。它的洗滌效果好,并具有減少非特異性吸附和增強(qiáng)抗原抗體結(jié)合的作用。陜西細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)