廣東醫(yī)學實驗外包

醫(yī)學實驗外包，分子機制研究，我們選好明星分子以后，調(diào)控層次就是要考慮的問題了，這里說的調(diào)控層次就是圍繞中心法則展開對明星分子本身的探索，我們知道中心法則涉及到DNA-RNA-蛋白三個層面，根據(jù)調(diào)控的層次一般我們又分為轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平，轉(zhuǎn)錄我們知道是發(fā)生在細胞核里面的。所以我們看到某個分子定位在細胞核時我們一般就從轉(zhuǎn)錄水平進行考慮，比如轉(zhuǎn)錄因子對DNA序列的結(jié)合，DNA甲基化、組蛋白修飾等等，而當RNA被轉(zhuǎn)錄出來后要經(jīng)過加工過程，比如可變剪接，miRNA介導的降解，mRNA翻譯成蛋白，蛋白合成后會被磷酸化修飾或者泛素化修飾從而***或者降解等等，這些是轉(zhuǎn)錄后的水平。那么我們在確定明星分子后，一般來說需要首先確定的是變化發(fā)生在哪個層面，是RNA還是蛋白，是蛋白的產(chǎn)生（翻譯）、降解（比如泛素化）還是活化（比如磷酸化），從而把研究的焦點集中到明星分子的某個過程，這個層面是圍繞一個明星分子的前世今生來展開的。南京醫(yī)學實驗外包公司，結(jié)直腸*模型。廣東醫(yī)學實驗外包

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醫(yī)學實驗外包之ChIP染色質(zhì)免疫共沉淀實驗， 染色質(zhì)免疫沉淀的DNA適用于多種分析方法。如果目的蛋白的靶序列是已知的或與染色質(zhì)免疫沉淀的DNA雜交，來驗證目的蛋白與DNA靶序列的特需要驗證的，可采用狹縫雜交(Slot blot)的方法，把靶序列特異性探針異性結(jié)合。還可以根據(jù)靶序列設(shè)計引物，用半定量PCR的方法進行測定，或采用Real-time PCR方法進行定量分析。如果目的蛋白的靶序列是未知的或高通量的(high-throughput)，可采用Southern雜交。但因為免疫沉淀的DNA量較少，所以在研究時通常要用PCR方法擴增DNA探針，再進行整個基因組掃描。還可以把沉淀的DNA克隆到載體中，進行測序，尋找該序列附近的開放閱讀框，發(fā)現(xiàn)新的基因調(diào)節(jié)序列。廣東醫(yī)學實驗外包