海南病理HE染色檢測(cè)

HE染色注意事項(xiàng)：1、染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長(zhǎng)，組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時(shí)間長(zhǎng)一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行，一般以細(xì)胞核染色清楚（晰）而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長(zhǎng)分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺，應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時(shí)可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不徹底，應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前，切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時(shí)，要用中性樹脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會(huì)褪色，所用樹脂濃度要適當(dāng)，樹脂封固時(shí)不能有氣泡。HE染色注意事項(xiàng)以及常規(guī)的流程解析。海南病理HE染色檢測(cè)

HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗(yàn)證。2)切片經(jīng)烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長(zhǎng)拖拉時(shí)間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證。3)脫蠟時(shí)間太短或振蕩太少，幅度太小；可延長(zhǎng)脫蠟時(shí)間或以多振蕩來驗(yàn)證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時(shí)間過久，導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去，在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域）：更換各道乙醇驗(yàn)證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶?jī)?nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號(hào)驗(yàn)證。6)更換脫蠟液體時(shí)試劑拿錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證。7)更換脫蠟液體時(shí)試劑次序放錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證。8)烤片時(shí)間短，切片上水分沒有烤干，也會(huì)導(dǎo)致著色不勻，出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域。海南質(zhì)量好的HE染色報(bào)告HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化。

HE染色法的話，不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色，實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色，胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色?；蛘咴敿?xì)說明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ；伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。

HE染色：在組織病理學(xué)中，蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法。常規(guī)蘇木素染色的對(duì)比染色是用伊紅，也有采用焰紅，因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明，還有采用橘黃G，比布里希猩紅，波爾多紅等作為對(duì)比染色。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料，本身溶于醇而不溶于水，為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶。配方：伊紅Y（水溶）0.5-1g，蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y（醇溶性）應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸，可以加速其染色過程，使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色，胞質(zhì)、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色。科研常備實(shí)驗(yàn)操作之HE染色。

HE染色不管怎么操作，始終無法染色或淡染答：這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長(zhǎng);或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救：防患于未然，要么使用新鮮的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對(duì)于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定；對(duì)于已經(jīng)制出的片子，染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上，然后自來水漂洗5min，可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中，補(bǔ)充染色媒介，增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上，單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。關(guān)于HE染色，常用的結(jié)果分析原理。湖北推薦的HE染色價(jià)格

心臟組織HE染色如何觀察。海南病理HE染色檢測(cè)

HE染色原理：一、細(xì)胞核染色原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。二、細(xì)胞漿染色原理：細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系，當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí)，胞漿對(duì)外不顯電性，此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí)，大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值，表現(xiàn)酸性電離，而帶負(fù)電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，現(xiàn)時(shí)胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽(yáng)離子），就可被帶負(fù)電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽(yáng)離子）結(jié)合而使細(xì)胞漿染色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比海南病理HE染色檢測(cè)

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