河北光譜儀分光光度計教程

來源: 發(fā)布時間:2021-11-23

并交替通過入射狹縫進入單色器中,經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上,色散并通過出射狹縫之后,被濾光片濾除高級次光譜,再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測器的接收面上。探測器將上述交變的信號轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號,經(jīng)放大器進行電壓放大后,轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位,計算機處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。JC-HW30A雙光束紅外分光光度計二、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的概述不同:1、紫外分光光度計的概述:根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是比較大吸收波長λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計的概述:由光源發(fā)出的光,被分為能量均等對稱的兩束,一束為樣品光通過樣品,另一束為參考光作為基準。這兩束光通過樣品室進入光度計后,被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制,形成交變信號。三、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的應(yīng)用不同:1、紫外分光光度計的應(yīng)用:將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)。紫外分光光度計的光譜是帶狀光譜。河北光譜儀分光光度計教程

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原子熒光光度計具有原子吸收光譜和原子發(fā)射光譜兩種技術(shù)優(yōu)勢,并克服現(xiàn)有分析技術(shù)的不足,是一種優(yōu)良的痕量分析儀器。其原理是利用硼氫化鉀或硼氫化鈉作為還原劑,將樣品溶液中的待分析元素還原為揮發(fā)性共價氣態(tài)氫化物,然后借助載氣將其導入原子化器進行原子化而形成基態(tài)原子?;鶓B(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)原子在去活化過程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來,此熒光信號的強弱與樣品中待測元素的含量成線性關(guān)系,因此通過測量熒光強度就可以確定樣品中被測元素的含量。海南國產(chǎn)分光光度計推薦分光光度計從分光元件來講可分為棱鏡式和光柵式兩種,也有光柵加棱鏡的分光光度計。

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紫外-可見分光光度計是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。其工作原理為分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。本文介紹的是日立U-3010型號紫外分光光度計的使用方法。日立U-3010型號紫外分光光度計的使用1.開電源,先開U-3010電源,再啟動電腦2.點擊桌面上UV,啟動程序3.點擊method窗口,將會出現(xiàn)GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五個對話框,如下圖所示:4.設(shè)置(1)General對話框;(2)Quantitation對話框,如果測波長選擇wavelength,數(shù)量可選多個,比如測定:260nm,280nm,230nm,則選擇3個;如圖所示:(3)Instrument對話框,將你要測定的波長值依次輸入框內(nèi);(4)設(shè)置好后,點確定鍵5.放入空白對照。

點擊上方藍字關(guān)注“公眾號”分光光度計分光光度計是實驗室檢測核酸或者蛋白樣品濃度**常用的工具之一。儀器使用頻繁,但甚少見到有人維護。其實,保持分光光度計清潔、無污染是成功操作的關(guān)鍵。清潔儀器我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計的表面。刺激性的清潔劑可能會損壞儀器表面。你也可以清潔比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無絨棉簽來清潔。這可防止液體進入內(nèi)部。如果你必須要用水清潔,那么可用蘸有乙醇或異丙醇的棉簽來加速干燥。比色皿插槽的蓋子也可以清潔,但不是泡在清潔劑中。如有必要,拆下蓋子,用蘸有溫和清潔劑的軟布或無絨棉簽來清潔。此外,平時不使用時,應(yīng)蓋上比色皿插槽的蓋子,以免灰塵或其他污染物落入。消毒和凈化如果分光光度計被微生物所污染,那么可采用下列步驟進行消毒和凈化。首先,利用溫和的清潔劑來清潔設(shè)備。然后,用蘸有消毒劑(通常是酒精溶液)的軟布擦拭表面。如有必要,拆下并清潔比色皿插槽。檢查組件維護的另一方面在于檢查分光光度計的光度準確性。Eppendorf提供了一個濾光片系統(tǒng)(BioSpectrometerreferencefilterkit),以評估光度準確性和系統(tǒng)的波長誤差。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為分光光度計的光源。

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在測量準確性和精確度時,將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長時,測定三個測試濾光片在對應(yīng)波長(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個波長的變異系數(shù)。許多分光光度計,包括Eppendorf的所有儀器,都帶有一個特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運行一次自檢,但自動自檢的頻率可根據(jù)需要進行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個部分。它通過測定現(xiàn)有波長的隨機誤差來校驗檢測器,通過檢查大能量、隨機誤差、基準傳感器的信號和光強度來校驗光源。分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。國產(chǎn)分光光度計型號

紫外-可見分光光度計應(yīng)遠離發(fā)出磁場、電場和高頻電磁波的電氣裝置。河北光譜儀分光光度計教程

由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。但是,當吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時波長準確度的影響就必須引起注意。2、透射比(吸光度)準確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準確性。3、雜散光雜散光是由于光學元件制造誤差以及光學和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。使用與維護1、若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。2、指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進行機械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈。河北光譜儀分光光度計教程

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分光光度計,又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。