紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)是基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。其工作原理為分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。本文介紹的是日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用方法。日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用1.開(kāi)電源,先開(kāi)U-3010電源,再啟動(dòng)電腦2.點(diǎn)擊桌面上UV,啟動(dòng)程序3.點(diǎn)擊method窗口,將會(huì)出現(xiàn)GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五個(gè)對(duì)話框,如下圖所示:4.設(shè)置(1)General對(duì)話框;(2)Quantitation對(duì)話框,如果測(cè)波長(zhǎng)選擇wavelength,數(shù)量可選多個(gè),比如測(cè)定:260nm,280nm,230nm,則選擇3個(gè);如圖所示:(3)Instrument對(duì)話框,將你要測(cè)定的波長(zhǎng)值依次輸入框內(nèi);(4)設(shè)置好后,點(diǎn)確定鍵5.放入空白對(duì)照。光度計(jì)的應(yīng)用范圍十分廣闊。福建可見(jiàn)分光光度計(jì)教程
在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí),將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí),測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。許多分光光度計(jì),都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢,但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過(guò)測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來(lái)校驗(yàn)檢測(cè)器,通過(guò)檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來(lái)校驗(yàn)光源。四川光度計(jì)使用光度計(jì)的制作方法難嗎?上海元析告訴您。
儀器使用頻繁,但甚少見(jiàn)到有人維護(hù)。其實(shí),保持分光光度計(jì)清潔、無(wú)污染是成功操作的關(guān)鍵。清潔儀器我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計(jì)的表面。刺激性的清潔劑可能會(huì)損壞儀器表面。你也可以清潔比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無(wú)絨棉簽來(lái)清潔。這可防止液體進(jìn)入內(nèi)部。如果你必須要用水清潔,那么可用蘸有乙醇或異丙醇的棉簽來(lái)加速干燥。比色皿插槽的蓋子也可以清潔,但不是泡在清潔劑中。如有必要,拆下蓋子,用蘸有溫和清潔劑的軟布或無(wú)絨棉簽來(lái)清潔。此外,平時(shí)不使用時(shí),應(yīng)蓋上比色皿插槽的蓋子,以免灰塵或其他污染物落入。消毒和凈化如果分光光度計(jì)被微生物所污染,那么可采用下列步驟進(jìn)行消毒和凈化。首先,利用溫和的清潔劑來(lái)清潔設(shè)備。然后,用蘸有消毒劑(通常是酒精溶液)的軟布擦拭表面。如有必要,拆下并清潔比色皿插槽。檢查組件維護(hù)的另一方面在于檢查分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確性。Eppendorf提供了一個(gè)濾光片系統(tǒng)(BioSpectrometerreferencefilterkit),以評(píng)估光度準(zhǔn)確性和系統(tǒng)的波長(zhǎng)誤差。
一些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見(jiàn)光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見(jiàn)光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區(qū)域。分光光度計(jì)的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧?shí)驗(yàn)精確要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。為了測(cè)量吸光值,分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二極管。上海光度計(jì)的特點(diǎn)分析;
分光光度計(jì)的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。實(shí)驗(yàn)室研究人員希望省錢購(gòu)入專門儀器定量核酸、蛋白或者細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長(zhǎng)下測(cè)量樣品。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進(jìn)行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長(zhǎng),通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。光度計(jì)有哪些種類?上海元析告訴您。湖南分光光度計(jì)教程
上海元析的光度計(jì)是否結(jié)實(shí)耐用?福建可見(jiàn)分光光度計(jì)教程
并發(fā)現(xiàn)吸收光譜相似的有機(jī)物質(zhì),它們的結(jié)構(gòu)也相似。并且,可以解釋用化學(xué)方法所不能說(shuō)明的分子結(jié)構(gòu)問(wèn)題,初步建立了紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的理論基礎(chǔ),以此推動(dòng)了紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的發(fā)展。1918年美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局研制成了世界上diyi臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(不是商品儀器,很不成熟)。此后,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)很快在各個(gè)領(lǐng)域的分析工作中得到了應(yīng)用。朗伯早在1760年就發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對(duì)光的吸收與物質(zhì)的厚度成正比,后被人們稱之為朗伯定律;比耳在1852年又發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對(duì)光的吸收與物質(zhì)濃度成正比,后被人們稱之為比耳定律。在應(yīng)用中,人們把朗伯定律和比耳定律聯(lián)合起來(lái),又稱之為朗伯-比耳定律。隨后,人們開(kāi)始重視研究物質(zhì)對(duì)光的吸收,并試圖在物質(zhì)的定性、定量分析方面予以使用。因此,許多科學(xué)家開(kāi)始研究以比耳定律為理論基礎(chǔ)的儀器裝置。經(jīng)過(guò)一個(gè)漫長(zhǎng)的時(shí)期后,美國(guó)Beckman公司于1945年,推出世界上diyi臺(tái)成熟的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)商品儀器。從此,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的應(yīng)用開(kāi)始得到飛速發(fā)展。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的展望紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)雖然是一類有著很長(zhǎng)歷史的分析儀器,但每一次吸收了新的技術(shù)成果都使它煥發(fā)出新的活力。福建可見(jiàn)分光光度計(jì)教程
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