一些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。分光光度計的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧嶒灳_要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要。為了測量吸光值,分光光度計制造商通常使用光電倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二極管。超微量分光光度計是一種將復(fù)雜的光分解成光譜線的科學(xué)儀器!寧夏分光分光光度計教程
WFZ800-DA、756型等分光光度計,由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點,在維修、使用此類儀器時應(yīng)注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下,因此在預(yù)熱時,應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下:分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調(diào)至100%,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響。典型故障及其排除方法1、儀器不能調(diào)零??赡茉颍篴.光門不能完全關(guān)閉。解決方法:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉。b.透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕。c.儀器嚴(yán)重受潮。解決方法:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會兒使其干燥。吉林原子吸收分光分光光度計操作超微量分光光度計不需要比色皿!
編輯|steins來源|島津分析中心背景摘要:紫外可見分光光度計和熒光分光光度計都經(jīng)常用于樣品定量。使用紫外可見分光光度計進(jìn)行定量時基于朗伯比爾定律,測定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比。另一方面,利用熒光分光光度計時,使用熒光強(qiáng)度。在低濃度時,熒光強(qiáng)度與濃度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可見分光光度計和熒光分光光度計兩臺儀器分別測定了羅丹明B溶液。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì)。關(guān)于測定結(jié)果,對兩個機(jī)種的定量、檢測下限值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性度進(jìn)行了比較,下面將進(jìn)行介紹。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測定使用了紫外可見分光光度計UV-260Oi測定樣品吸光度。測定條件如表1所示。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中,調(diào)配~5ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。羅丹明B的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光光譜如圖1所示,根據(jù)544nm的吸光度值創(chuàng)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2和圖3所示。在圖2中,用~5ug/ml的6點和空白樣品(蒸餾水)創(chuàng)建,得到了線性度良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(相關(guān)系數(shù)的平方值是)。在圖3所示的低濃度區(qū)域中,噪聲的影響相對較大,導(dǎo)致線性較差。2熒光2羅丹明B溶液的熒光強(qiáng)度測定使用了熒光分光光度計RF-60O0測定了樣品熒光強(qiáng)度。測定條件如表2所示。
可見分光光度計【原理】可見分光光度計是一種結(jié)構(gòu)簡潔、使用方便的單光束分光光度計,基于樣品對單色光的選擇吸收特性可用于對樣品進(jìn)行定性和定量分析。其定量分析根據(jù)相對測量原理工作,即選定樣品的溶劑(或空氣)作為標(biāo)準(zhǔn)試樣,設(shè)定其透射比為100%,被測樣品的透射比則相對于標(biāo)準(zhǔn)試樣(或空氣)而得到,在一定的濃度范圍,各參量遵循朗伯—比耳定律:A:吸光度T:相對于標(biāo)準(zhǔn)試樣的透射比I:光透過被測樣品后照射到光電傳感器上的強(qiáng)度I0:光透過標(biāo)準(zhǔn)試樣后照射到光電傳感器上的強(qiáng)度K:樣品溶液的比消光系數(shù)L:樣品溶液在光路中的長度C:樣品濃度【儀器結(jié)構(gòu)】【使用方法】(1)開機(jī)預(yù)熱儀器接通電源,微機(jī)進(jìn)行系統(tǒng)自檢,LCD顯示窗口顯示相應(yīng)的產(chǎn)品型號后,儀器進(jìn)入工作狀態(tài)。默認(rèn)的工作模式是T。注意:為使內(nèi)部達(dá)到熱平衡,開機(jī)預(yù)熱時間不小于30分鐘。(2)改變波長通過旋轉(zhuǎn)波長手輪改變波長,并在波長觀察窗的刻度選擇所需的波長。(3)放置參比與待測樣品選擇測試用的比色皿,把盛放參比和待測液的樣品放入樣品架內(nèi),通過樣品架拉桿來選擇樣品的位置。當(dāng)拉桿到位時有定位感,到位時輕輕推拉一下以保證定位的正確。(4)調(diào)0%T、調(diào)100%T/0A為保證儀器進(jìn)入正確的測試狀態(tài)。分析儀器工作者要懂得分光光度計的日常維護(hù)和對主要技術(shù)指標(biāo)的簡易測試方法。
紫外-可見分光光度計是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。其工作原理為分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。本文介紹的是日立U-3010型號紫外分光光度計的使用方法。日立U-3010型號紫外分光光度計的使用1.開電源,先開U-3010電源,再啟動電腦2.點擊桌面上UV,啟動程序3.點擊method窗口,將會出現(xiàn)GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五個對話框,如下圖所示:4.設(shè)置(1)General對話框;(2)Quantitation對話框,如果測波長選擇wavelength,數(shù)量可選多個,比如測定:260nm,280nm,230nm,則選擇3個;如圖所示:(3)Instrument對話框,將你要測定的波長值依次輸入框內(nèi);(4)設(shè)置好后,點確定鍵5.放入空白對照。超微量分光光度計一般具有多個光程!湖北火焰分光分光光度計原理
紫外可見分光光度計的鎢燈光源發(fā)出400~760nm波長的光譜。寧夏分光分光光度計教程
由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。2、透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。3、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標(biāo)。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。2、指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈。寧夏分光分光光度計教程