常見(jiàn)的SCPCL-5妥爾油脂肪酸，粗妥爾油（CTO）是硫酸鹽制法制漿廠的副產(chǎn)品。
編碼感興趣的特定分離的多肽的多核苷酸序列將被插入表達(dá)載體中并且任選地被可操作地連接至表達(dá)控制序列上，該表達(dá)控制序列適于在希望的宿主中表達(dá)該蛋白質(zhì)?？梢酝ㄟ^(guò)核苷酸測(cè)序、限制性酶切作圖和生物活性多肽在適合的宿主內(nèi)的表達(dá)來(lái)確認(rèn)適當(dāng)?shù)慕M裝。如本領(lǐng)域所熟知的，為了在宿主中獲得轉(zhuǎn)染的高表達(dá)水平，可以將該可操作地連接至轉(zhuǎn)錄和翻譯表達(dá)控制序列上，這些序列在所選的表達(dá)宿主中具有功能性。重組表達(dá)載體可以用于擴(kuò)增和表達(dá)編碼特異性新生抗原肽的dna。重組表達(dá)載體是可復(fù)制的dna構(gòu)建體，它們具有編碼特異性新生抗原肽或生物等價(jià)類(lèi)似物的合成或cdna衍生的dna片段，這些dna片段被可操作地連接至適合的轉(zhuǎn)錄或翻譯調(diào)節(jié)元件上，這些調(diào)節(jié)元件來(lái)源于哺乳動(dòng)物、微生物、病毒或昆蟲(chóng)。
在表達(dá)中具有調(diào)節(jié)作用的一種或多種遺傳元件，例如，轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子或增強(qiáng)子；被轉(zhuǎn)錄成mrna并被翻譯成蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)或編碼序列；適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)錄和翻譯起始和終止序列，如下文所詳述的。這樣的調(diào)節(jié)元件可以包括用于控制轉(zhuǎn)錄的操縱子序列?？梢粤硗鈸饺胪ǔＹx予在宿主中進(jìn)行復(fù)制的能力的復(fù)制起點(diǎn)以及有助于識(shí)別轉(zhuǎn)化體的選擇。當(dāng)dna區(qū)域在功能上彼此相關(guān)時(shí)，將它們可操作地連接。的dna可操作地連接至多肽的dna，如果它被表達(dá)為參與多肽的分泌的前體的話；
表達(dá)控制序列和表達(dá)載體的選擇將取決于宿主的選擇。可以使用多種多樣的表達(dá)宿主/載體組合。用于真核宿主的有用的表達(dá)載體包括例如包括來(lái)自sv牛乳頭瘤病毒、腺病毒和巨細(xì)胞病毒的表達(dá)控制序列的載體。用于細(xì)菌宿主的有用的表達(dá)載體包括已知的細(xì)菌質(zhì)粒，諸如來(lái)自大腸桿菌的質(zhì)粒包括pcr pbrpmb9及其衍生物，更寬的宿主范圍質(zhì)粒諸如m13和絲狀單鏈dna噬菌體。用于表達(dá)多肽的合適的宿主細(xì)胞包括處于適當(dāng)?shù)膯?dòng)子的控制下的原核生物、酵母、昆蟲(chóng)或高等真核細(xì)胞。
高等真核細(xì)胞包括建立的哺乳動(dòng)物來(lái)源的細(xì)胞系。還可以利用無(wú)細(xì)胞翻譯系統(tǒng)。還有利地利用各種哺乳動(dòng)物或昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)來(lái)表達(dá)重組蛋白。
可以進(jìn)行哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的重組蛋白的表達(dá)，因?yàn)檫@樣的蛋白質(zhì)通常被正確折疊，適當(dāng)修飾并且具有功能性。hela以及bhk細(xì)胞系。哺乳動(dòng)物表達(dá)載體可以包括非轉(zhuǎn)錄元件諸如復(fù)制起點(diǎn)、連接至待表達(dá)的上的合適的啟動(dòng)子和增強(qiáng)子以及其他5’或3’側(cè)翼非轉(zhuǎn)錄序列和5’或3’非翻譯序列，諸如必要的核糖體結(jié)合位點(diǎn)、聚腺苷酸化位點(diǎn)、剪接供體和受體位點(diǎn)以及轉(zhuǎn)錄終止序列?？梢愿鶕?jù)任何合適的方法純化由轉(zhuǎn)化宿主產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。離心、差別溶解度或通過(guò)用于蛋白質(zhì)純化的任何其他標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。轉(zhuǎn)移酶等可以附接至蛋白質(zhì)上，以允許通過(guò)穿過(guò)適當(dāng)?shù)挠H和柱而容易地純化。還可以使用諸如蛋白水解、核磁共振和x射線晶體學(xué)的技術(shù)用物理方法表征分離的蛋白質(zhì)。